रगत प्रत्यक्ष पीसीआर किट

लक्ष्य जीन को द्रुत प्रवर्धन सीधा निष्कर्षण बिना एक टेम्पलेट को रूप मा रगत को उपयोग।

यो किट एक आनुवंशिक ईन्जिनियरि anti विरोधी अवरोधक डीएनए पोलीमरेज कुशलतापूर्वक मानव जीनोम मा एकल प्रतिलिपि जीन बढाउन अपनाउँछ। यस किट मा राम्रो संग अनुकूलित बफर प्रणाली पोलीमरेज़ लाई बलियो पीसीआर अवरोधकों को अवरोध को प्रतिरोध गर्न मा मद्दत गर्दछ, यस प्रकार सीधा टेम्पलेट को रूप मा रगत र सुसंस्कृत कोशिकाहरु को उपयोग गरेर डीएनए बढाउन सक्छ। यो उत्पादन संचालित गर्न को लागी सजिलो छ र यस्तो डीएनए शुद्धीकरण वा नमूना pretreatment को रूप मा जटिल चरणहरु को आवश्यकता छैन।
यो किट २ × MasterMix को रूप मा प्रदान गरीएको छ, र प्रतिक्रिया मात्र रगत टेम्प्लेट र सम्बन्धित पत्ता लगाउने प्राइमरहरु जोड्दा प्रदर्शन गर्न सकिन्छ। यो मानव, चूहों, सुँगुर, गाईवस्तु र अन्य प्रजातिहरु, साथै ताजा वा ४ ℃ cryopreserved सम्पूर्ण रगत, anticoagulant (EDTA, साइट्रेट, हेपरिन), तरलीकृत रगत थक्के र सुक्खा रगत धब्बाहरु को रूप मा स्तनधारियों को सुसंस्कृत कोशिकाहरु मा लागू गर्न सकिन्छ Whatman 903 र FTA Elute वाणिज्यिक कार्ड मा भण्डारण।

बिरालो। होइन	प्याकिंग आकार
4992529	20 µl × 100 rxn
4992530	20 µl × 500 rxn

हामीलाई ईमेल पठाउनुहोस्

उत्पादन विवरण

प्रयोगात्मक उदाहरण

अक्सर सोधिने प्रश्न

उत्पादन ट्याग

विशेषताहरु

■ सरल र छिटो: पीसीआर प्रवर्धन सीधै टेम्पलेट को रूप मा रगत को उपयोग गरी प्रदर्शन गर्न सकिन्छ, नमूना तयारी र डीएनए निकासी को थकाऊ कदम को लागी आवश्यकता बिना।
■ उच्च शुद्धता: नमूना पूर्व उपचार र डीएनए निकासी चरणहरु को छोड्न को लागी नमूनाहरु को क्रस प्रदूषण बाट बच्न मद्दत गर्न सक्छ।
Through उच्च throughput: ठूलो मात्रा मा नमूनाहरु को लागी पीसीआर पहिचान 96/384-राम्रो पीसीआर प्लेटहरु संग किट को संयोजन गरेर प्रदर्शन गर्न सकिन्छ।
Univers बलियो सार्वभौमिकता: यो किट कुशलतापूर्वक उच्च जीसी टुक्रा वा जटिल माध्यमिक संरचना संग टुक्राहरु लाई बढाउन सक्छ, र प्रवर्धन लम्बाई 5 kb सम्म हुन सक्छ।
Stress बलियो तनाव प्रतिरोध: यो किट बिभिन्न प्रजातिहरु र रगतको नमूनाहरु बिभिन्न तरीकाले संरक्षित को लागी लागू गर्न सकिन्छ।

अनुप्रयोगहरु

यो किट को पीसीआर उत्पादनहरु ३′-अन्त मा "ए", जो सीधा टीए वेक्टर क्लोनिंग को लागी प्रयोग गर्न सकिन्छ। यो किट जीनोमिक डीएनए टुक्रा, उच्च throughput आनुवंशिक विश्लेषण र जीनोटाइपिंग (जस्तै जीन पत्ता लगाउने) विश्लेषण को प्रवर्धन को लागी प्रयोग गर्न सकिन्छ।

सबै उत्पादनहरु ODM/OEM को लागी अनुकूलित गर्न सकिन्छ। विवरण को लागी,कृपया अनुकूलित सेवा (ODM/OEM) क्लिक गर्नुहोस्

अघिल्लो: TIANcombi डीएनए Lyse र Det पीसीआर किट

अर्को: माउस ऊतक प्रत्यक्ष पीसीआर किट

	एक टेम्पलेट को रूप मा मानव EDTA anticoagulation को उपयोग, विभिन्न जीसी सामग्री संग 4 जीनहरु रक्त प्रत्यक्ष पीसीआर किट द्वारा प्रवर्धित गरिएको थियो। पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली 20 μl थियो, र 1 μl रगत टेम्पलेट को रूप मा प्रयोग गरीएको थियो। M: TIANGEN मार्कर II; 1: टुक्रा आकार 1090 बीपी, जीसी सामग्री 68.1%; 2: टुक्रा आकार 1915 बीपी, जीसी सामग्री 70.4%; 3: टुक्रा आकार 448 बीपी, जीसी सामग्री 74.8%; 4: टुक्रा आकार 1527 बीपी, जीसी सामग्री 61.5%। प्रायोगिक परिणाम: रगत प्रत्यक्ष पीसीआर किट प्रभावी ढंगले 61.5%-74.8%को दायरा मा जीसी सामग्री संग डीएनए टुक्राहरु लाई बढाउन सक्छ, सुझाव छ कि यो उच्च जीसी टुक्राहरु लाई बढाउन को लागी सक्षम छ।
	टेम्पलेट को रूप मा मानव EDTA anticoagulation को उपयोग गरी, विभिन्न लम्बाई (ActB, Prp, DN1.0, Hn2.0 र Hn4.0) संग 5 जीन ब्लड डायरेक्ट पीसीआर किट द्वारा प्रवर्धित गरियो। पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली 20 μl थियो, र 1 μl रगत टेम्पलेट को रूप मा प्रयोग गरीएको थियो। M: TIANGEN मार्कर II; 1-3: 3 फरक रगत नमूनाहरु; NTC: प्राइमर बिना नियन्त्रण। प्रयोगात्मक परिणामहरु: रगत प्रत्यक्ष पीसीआर किट लामो kb को रूप मा लामो संग टुक्राहरु लाई बढाउन सक्छ, यो लामो टुक्राहरु लाई बढाउन को लागी सक्षम छ सुझाव।
	टेम्पलेट को रूप मा मानव EDTA anticoagulation को उपयोग गरी, रगत प्रत्यक्ष पीसीआर किट बिभिन्न रक्त नमूनाहरु को पीसीआर पत्ता लगाउन को लागी प्रयोग गरीएको थियो। पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली 20 μl थियो, र 1 μl रगत टेम्पलेट को रूप मा प्रयोग गरीएको थियो। M: TIANGEN मार्कर II; 1-9: रगत को लोड मात्रा 0.1 μl, 0.2 μl, 0.3 μl, 0.4 μl, 1 μl, 2 μl, 3 μl, 4 μl र 5 μl, क्रमशः छ; NTC: कुनै टेम्पलेट बिना नियन्त्रण प्रायोगिक परिणाम: रगत प्रत्यक्ष पीसीआर किट रगत को लागी कडा प्रतिरोध छ र 0.1-5 μl को लोडिंग दायरा संग रगत नमूनाहरु लाई बढाउन सक्छ।
	मानव, मुसा, कुखुरा र अन्य प्रजातिहरु बाट बिभिन्न उपचार संग रगत को नमूना टेम्प्लेट को रूप मा प्रयोग गरीएको थियो। ब्लड डायरेक्ट पीसीआर किट PRNP (मानव, 50५० बीपी), एक्टिन (मुसा, २०० बीपी), र Act-एक्टिन (चिकन, १.० केबी) लाई बढाउन को लागी प्रयोग गरीएको थियो। पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली 20 μl थियो, र 1 μl रगत टेम्पलेट को रूप मा प्रयोग गरीएको थियो। M: TIANGEN मार्कर II। प्रायोगिक परिणाम: रगत प्रत्यक्ष पीसीआर किट नमूनाहरु को एक विस्तृत श्रृंखला मा लागू गर्न सकिन्छ, र सीधा पीसीआर पत्ता लगाउन विभिन्न उपचार संग विभिन्न प्रजातिहरु बाट रगत नमूनाहरु मा प्रदर्शन गर्न सकिन्छ।

Q: कुनै प्रवर्धन ब्यान्ड छैन

A-1 टेम्पलेट

■ टेम्पलेट प्रोटीन अशुद्धता वा Taq अवरोधक, आदि समावेश गर्दछ DNAPnify डीएनए टेम्पलेट, प्रोटीन अशुद्धता हटाउन वा शुद्धिकरण किट संग टेम्पलेट डीएनए निकाल्नुहोस्।

Template टेम्पलेट को विकृति पूर्ण छैन rop उपयुक्त रूप बाट विकृति तापमान वृद्धि र विकृति समय लम्बाउने।

■ टेम्पलेट गिरावट the टेम्प्लेट पुन: तयार गर्नुहोस्।

A-2 प्राइमर

Pri प्राइमर को गरीब गुणस्तर eRimer- संश्लेषण प्राइमर।

■ प्राइमर गिरावट ——Aliquot संरक्षण को लागी सानो मात्रा मा उच्च एकाग्रता प्राइमर। धेरै चिसो र पग्लन वा दीर्घकालीन 4 डिग्री सेल्सियस cryopreserved बच्न।

Pri प्राइमर को अनुचित डिजाइन (जस्तै प्राइमर लम्बाई पर्याप्त छैन, प्राइमर, आदि को बीच गठन dimer) -पुन: डिजाइन प्राइमर (प्राइमर dimer र माध्यमिक संरचना को गठन बाट बच्न)

A-3 मिलीग्राम^२+एकाग्रता

■ मिलीग्राम^२+ एकाग्रता धेरै कम छ - राम्रो संग Mg बढाउनुहोस्^२+एकाग्रता: एमजी अनुकूलन^२+ इष्टतम Mg निर्धारण गर्न 0.5 मिमी को एक अन्तराल संग 1 मिमी देखि 3 मिमी को प्रतिक्रियाहरु को एक श्रृंखला द्वारा एकाग्रता^२+ प्रत्येक टेम्पलेट र प्राइमर को लागी एकाग्रता।

A-4 एनीलिंग तापमान

■ उच्च annealing तापमान प्राइमर र टेम्पलेट को बाध्यता लाई प्रभावित गर्दछ। Ne annealing तापमान घटाउनुहोस् र २ डिग्री सेल्सियस को एक ढाल संग हालत अनुकूलन।

A-5 विस्तार समय

■ छोटो विस्तार समय extension विस्तार समय बढाउनुहोस्।

Q: गलत सकारात्मक

घटना: नकारात्मक नमूनाहरु पनि लक्षित अनुक्रम ब्यान्ड देखाउँछन्।

पीसीआर को A-1 प्रदूषण

Target लक्ष्य अनुक्रम वा प्रवर्धन उत्पादनहरु को क्रस प्रदूषण fully सावधानीपूर्वक नकारात्मक नमूना मा लक्षित अनुक्रम युक्त नमूना pipet वा तिनीहरूलाई अपकेंद्रित्र ट्यूब बाहिर फैलाउन। अभिकर्मक वा उपकरण विद्यमान न्यूक्लिक एसिड लाई समाप्त गर्न को लागी आटोक्लेभ हुनु पर्छ, र प्रदूषण को अस्तित्व नकारात्मक नियन्त्रण प्रयोगहरु को माध्यम बाट निर्धारित गरिनु पर्छ।

■ अभिकर्मक प्रदूषण liAliquot अभिकर्मक र कम तापमान मा स्टोर।

A-2 प्राइमr

■ मिलीग्राम^२+ एकाग्रता धेरै कम छ - राम्रो संग Mg बढाउनुहोस्^२+ एकाग्रता: एमजी अनुकूलन^२+ इष्टतम Mg निर्धारण गर्न 0.5 मिमी को एक अन्तराल संग 1 मिमी देखि 3 मिमी को प्रतिक्रियाहरु को एक श्रृंखला द्वारा एकाग्रता^२+ प्रत्येक टेम्पलेट र प्राइमर को लागी एकाग्रता।

■ अनुचित प्राइमर डिजाइन, र लक्ष्य अनुक्रम गैर लक्ष्य अनुक्रम संग समरूपता छ। E पुनः डिजाइन प्राइमरहरु।

Q: गैर विशिष्ट प्रवर्धन

घटना: पीसीआर प्रवर्धन ब्यान्ड अपेक्षित आकार संग असंगत छन्, या त ठूलो वा सानो, वा कहिले काहिँ दुबै विशिष्ट प्रवर्धन ब्यान्ड र गैर विशिष्ट प्रवर्धन ब्यान्ड हुन्छन्।

A-1 प्राइमर

Oor गरीब प्राइमर विशिष्टता

E पुनः डिजाइन प्राइमर।

■ प्राइमर एकाग्रता धेरै उच्च छ ro राम्रोसँग विकृति तापमान बढाउनुहोस् र विकृति समय लम्बाउनुहोस्।

A-2 मिलीग्राम^२+ एकाग्रता

Mg एमजी^२+ एकाग्रता धेरै उच्च छ - राम्रो संग Mg2+ एकाग्रता घटाउनुहोस्: Mg लाई अनुकूलित गर्नुहोस्^२+ इष्टतम Mg निर्धारण गर्न 0.5 मिमी को एक अन्तराल संग 1 मिमी देखि 3 मिमी को प्रतिक्रियाहरु को एक श्रृंखला द्वारा एकाग्रता^२+ प्रत्येक टेम्पलेट र प्राइमर को लागी एकाग्रता।

A-3 थर्मोस्टेबल पोलीमरेज

En अत्यधिक एन्जाइम मात्रा 0.5Reduce एन्जाइम मात्रा ०.५ यू को अन्तराल मा उचित।

A-4 एनीलिंग तापमान

■ annealing तापमान धेरै कम छ rop उपयुक्त annealing तापमान वृद्धि वा दुई-चरण annealing विधि अपनाउने

A-5 पीसीआर चक्र

Many धेरै धेरै पीसीआर चक्र PC पीसीआर चक्र को संख्या घटाउनुहोस्।

Q: Patchy वा धब्बा ब्यान्ड

A-1 प्राइमरOor गरीब विशिष्टता —— प्राइमर पुनः डिजाइन, यसको विशिष्टता बृद्धि गर्न को लागी प्राइमर को स्थिति र लम्बाई परिवर्तन गर्नुहोस्; वा नेस्टेड पीसीआर प्रदर्शन गर्नुहोस्।

A-2 टेम्प्लेट डीएनए

Template टेम्प्लेट शुद्ध छैन the टेम्पलेट शुद्ध वा शुद्धीकरण किट संग डीएनए निकाल्नुहोस्।

A-3 मिलीग्राम^२+ एकाग्रता

—— एमजी^२+ एकाग्रता धेरै उच्च छ - राम्रो संग Mg घटाउनुहोस्^२+ एकाग्रता: एमजी अनुकूलन^२+ इष्टतम Mg निर्धारण गर्न 0.5 मिमी को एक अन्तराल संग 1 मिमी देखि 3 मिमी को प्रतिक्रियाहरु को एक श्रृंखला द्वारा एकाग्रता^२+ प्रत्येक टेम्पलेट र प्राइमर को लागी एकाग्रता।

A-4 dNTP

DDNTPs को एकाग्रता धेरै उच्च dDNTP को एकाग्रता उचित कम गर्नुहोस्

A-5 एनीलिंग तापमान

LowToo कम annealing तापमान rop उपयुक्त annealing तापमान वृद्धि

A-6 चक्र

ManyToo धेरै चक्र cycle अनुकूलन चक्र संख्या

प्रश्न: कती टेम्प्लेट डीएनए एक 50 μl पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली मा जोड्नु पर्छ?

प्रश्न: लामो टुक्रा कसरी बढाउने?

पहिलो चरण उपयुक्त पोलिमरेज छान्नु हो। नियमित Taq पोलीमरेज़ 3'-5 'exonuclease गतिविधि को कमी को कारण प्रूफरीड गर्न सक्दैन, र बेमेल धेरै टुक्राहरु को विस्तार दक्षता कम हुनेछ। तसर्थ, नियमित Taq पोलीमरेज प्रभावी ढंगले ५ kb भन्दा ठूलो लक्ष्य टुक्रा बढाउन सक्दैन। विशेष परिमार्जन वा अन्य उच्च निष्ठा पोलीमरेज़ संग Taq पोलीमरेज विस्तार दक्षता सुधार गर्न र लामो टुक्रा प्रवर्धन को आवश्यकताहरु लाई पूरा गर्न को लागी चयन गरीनु पर्छ। यसको अतिरिक्त, लामो टुक्राहरु को प्रवर्धन पनि प्राइमर डिजाइन, विकृति समय, विस्तार समय, बफर पीएच, आदि को समान समायोजन को आवश्यकता छ। सामान्यतया, १-2-२४ बीपी संग प्राइमर राम्रो उपज को लागी नेतृत्व गर्न सक्छ। आदेश टेम्प्लेट क्षति रोक्न को लागी, 4 ४ डिग्री सेल्सियस मा विकृति समय प्रति चक्र ३० सेकेन्ड वा कम गर्न को लागी, र प्रवर्धन भन्दा पहिले 4 ४ डिग्री सेल्सियस मा तापमान वृद्धि गर्न को लागी १ मिनेट भन्दा कम हुनु पर्छ। यसबाहेक, लगभग 68 डिग्री सेल्सियस मा विस्तार तापमान सेट र १ kb/मिनेट को दर अनुसार विस्तार समय डिजाइन लामो टुक्राहरु को प्रभावी प्रवर्धन सुनिश्चित गर्न सक्नुहुन्छ।

प्रश्न: पीसीआर को प्रवर्धन निष्ठा कसरी सुधार गर्ने?

पीसीआर प्रवर्धन को त्रुटि दर उच्च निष्ठा संग विभिन्न डीएनए पोलीमेरेस को उपयोग गरेर कम गर्न सकिन्छ। सबै टाक डीएनए पोलीमेरेस मा अब सम्म पाईएको छ, Pfu एंजाइम सबैभन्दा कम त्रुटि दर र उच्चतम निष्ठा छ (संलग्न तालिका हेर्नुहोस्)। एन्जाइम चयन को अतिरिक्त, शोधकर्ताहरु लाई पीसीआर उत्परिवर्तन दर लाई अनुकूलन बफर संरचना, थर्मोस्टेबल पोलीमरेज को एकाग्रता र पीसीआर चक्र संख्या अनुकूलन सहित प्रतिक्रिया शर्तहरु लाई अनुकूलन गरेर कम गर्न सक्छ।

यहाँ तपाइँको सन्देश लेख्नुहोस् र हामीलाई पठाउनुहोस्

उत्पादन कोटिहरु

हामीलाई किन छान्नुहोस्

यसको स्थापना पछि, हाम्रो कारखाना सिद्धान्त पालन संग पहिलो विश्वस्तरीय उत्पादनहरु को विकास गरी रहेको छ
पहिले गुणस्तरीय। हाम्रा उत्पादनहरु उद्योग मा उत्कृष्ट प्रतिष्ठा र नयाँ र पुराना ग्राहकहरु को बीच ब्यवहार बिश्वास प्राप्त गरेका छन्।

जांच