सीरम/प्लाज्मा डीएनए किट परिसंचरण

A-1 को शुरुवात नमूना मा सेल वा भाइरस को कम एकाग्रता-कोशिका वा भाइरस को एकाग्रता समृद्ध।

नमूनाहरु को एक -2 अपर्याप्त lysis samples नमूनाहरु लाई lysis बफर संग राम्रो संग मिश्रित गरिएको छैन। यो राम्रो तरिकाले 1-2 पटक को लागी पल्स- vortexing द्वारा मिश्रण गर्न को लागी सुझाव दिइएको छ। Protein अपर्याप्त सेल lysis प्रोटीनेज K को गतिविधि कमी को कारणले हुन्छ। अपर्याप्त न्यानो स्नान समय को कारण अपर्याप्त सेल lysis वा प्रोटीन गिरावट। यो सानो टुक्राहरु मा ऊतक काट्ने र lysate मा सबै अवशेषहरु लाई हटाउन को लागी नुहाउने समय को विस्तार गर्न को लागी सुझाव दिइएको छ।

A-3 अपर्याप्त डीएनए सोखना। Lysate स्पिन स्तम्भमा स्थानान्तरण हुनुभन्दा पहिले कुनै इथेनॉल वा १००% इथेनॉल को सट्टामा कम प्रतिशत थपिएको थिएन।

A-4 क्षालन बफर को पीएच मान धेरै कम छ। 8.0-8.3 को बीचमा पीएच समायोजित गर्नुहोस्।

Eluent मा अवशिष्ट इथेनॉल।

HereThere eluent मा अवशिष्ट धुने बफर PW छ। इथेनॉल 3-5 मिनेट को लागी स्पिन स्तम्भ centrifuging द्वारा हटाउन सकिन्छ, र तब 1-2 मिनेट को लागी कोठा को तापमान वा 50 डिग्री इन्क्यूबेटर मा राखी।

A-1 नमूना ताजा छैन। Control नमूना मा डीएनए बिग्रेको छ कि छैन भनेर निर्धारण गर्न को लागी नियन्त्रण को रूप मा एक सकारात्मक नमूना डीएनए निकाल्नुहोस्।

A-2 अनुचित पूर्व उपचार। Excessive अत्यधिक तरल नाइट्रोजन पीस, नमी पुनः प्राप्त, वा नमूना को धेरै ठूलो मात्रा को कारण।

Pretreatments फरक नमूनाहरु को लागी फरक फरक हुनुपर्छ। बिरुवा नमूनाहरु को लागी, राम्रो संग तरल नाइट्रोजन मा पीस सुनिश्चित गर्नुहोस्। पशु नमूनाहरु को लागी, homogenate वा राम्ररी तरल नाइट्रोजन मा पीस। सेल भित्ताहरु संग नमूनाहरु को लागी जो तोड्न कठिन छ, जस्तै जी+ ब्याक्टेरिया र खमीर को लागी, यो लाइसोजाइम, लाइटिकास वा मेकानिकल विधिहरु को उपयोग गर्न को लागी सेल पर्खालहरु भंग गर्न को लागी सुझाव दिईन्छ।

4992201/4992202 प्लान्ट जीनोमिक डीएनए किट एक स्तम्भ आधारित विधि अपनाउँछ कि निकासी को लागी क्लोरोफर्म को आवश्यकता छ। यो विशेष गरी विभिन्न बिरुवा नमूनाहरु, साथ साथै बिरुवा सूखी पाउडर को लागी उपयुक्त छ। हाई- DNAsecure संयंत्र किट पनि स्तम्भ आधारित छ, तर फिनोल/क्लोरोफर्म निकासी को कुनै आवश्यकता संग, यो सुरक्षित र गैर विषाक्त बनाउन। यो उच्च polysaccharides र polyphenol सामग्री संग बिरुवाहरु को लागी उपयुक्त छ। 4992709/4992710 DNAquick संयंत्र प्रणाली एक तरल आधारित विधि अपनाउँछ। Phenol/क्लोरोफर्म निकासी को रूप मा राम्रो संग आवश्यक छैन। शुद्धिकरण प्रक्रिया सरल र छिटो नमूना शुरू मात्रा को लागी कुनै सीमा संग छैन, त्यसैले प्रयोगकर्ताहरु प्रयोगात्मक आवश्यकताहरु अनुसार लचीलो मात्रा समायोजित गर्न सक्छन्। GDNA टुक्राहरु को ठूलो आकार उच्च उपज संग प्राप्त गर्न सकिन्छ।

जीनोमिक डीएनए TIANamp रक्त डीएनए किट द्वारा मानव सम्पूर्ण रगत नमूनाहरु को विभिन्न मात्रा बाट निकालीएको थियो। परिणाम निम्नानुसार छन्। परिणाम मात्र सन्दर्भ को रूप मा सूचीबद्ध छन्, वास्तविक निष्कर्षण परिणाम नमूनाहरु को शर्तहरु मा निर्भर गर्दछ।

रगतको थक्का डीएनए निष्कर्षण यी दुई किटहरुमा प्रदान गरिएको अभिकर्मकहरु को उपयोग गरेर मात्र गर्न सकिन्छ रगत को थक्का डीएनए निकासी को लागी विशेष निर्देश को प्रोटोकल परिवर्तन गरेर। रगतको थक्का डीएनए निकासी प्रोटोकल को सफ्ट प्रतिलिपि अनुरोध मा जारी गर्न सकिन्छ।

1 मिलीलीटर पीबीएस, सामान्य नमकीन वा ते बफर संग ताजा नमूना निलम्बन। एक homogenizer द्वारा नमूना homogenize र centrifuging द्वारा एक ट्यूब को तल सम्म वर्षा स collect्कलन। Supernatant निपटान, र २०० μl बफर GA साथ वेग resuspend। निम्न डीएनए शुद्धीकरण निर्देशन अनुसार प्रदर्शन गर्न सकिन्छ।

प्लाज्मा, सीरम र शरीर को तरल पदार्थ को नमूना मा gDNA को शुद्धीकरण को लागी, TIANamp माइक्रो डीएनए किट सिफारिश गरीएको छ। सीरम/प्लाज्मा नमूनाहरु बाट भाइरस gDNA को शुद्धिकरण को लागी, TIANamp भाइरस डीएनए/आरएनए किट सिफारिश गरीएको छ। सीरम र प्लाज्मा नमूनाहरु बाट जीवाणु जीडीएनए को शुद्धीकरण को लागी, TIANamp ब्याक्टेरिया डीएनए किट सिफारिश गरीएको छ (लाइसोजाइम सकारात्मक ब्याक्टेरिया को लागी समावेश गरीनु पर्छ)। लार नमूनाहरु को लागी, हाय-स्वाब डीएनए किट र TIANamp ब्याक्टेरिया डीएनए किट सिफारिश गरीन्छ।

DNAsecure संयंत्र किट वा DNAquick संयंत्र प्रणाली कवक जीनोम निकासी को लागी सिफारिश गरीन्छ। खमीर जीनोम निकासी को लागी, TIANamp खमीर डीएनए किट सिफारिश गरीएको छ (lyticase स्वयं तयार हुनु पर्छ)।