आरएनए सजिलो छिटो ऊतक/सेल किट

A-1 सेल lysis वा homogenization पर्याप्त छैन

---- नमूना उपयोग घटाउनुहोस्, lysis बफर को मात्रा बढाउनुहोस्, homogenization र lysis समय वृद्धि।

A-2 नमूना रकम धेरै ठुलो छ

---- प्रयोग गरिएको नमूना को मात्रा घटाउनुहोस् वा lysis बफर को मात्रा बढाउनुहोस्।

A-1 अपर्याप्त सेल lysis वा homogenization

---- नमूना उपयोग घटाउनुहोस्, lysis बफर को मात्रा बढाउनुहोस्, homogenization र lysis समय वृद्धि।

A-2 नमूना रकम धेरै ठुलो छ

---- कृपया अधिकतम प्रशोधन क्षमता को लागी उल्लेख गर्नुहोस्।

A-3 आरएनए स्तम्भ बाट पुरा तरिकाले eluted छैन

---- RNase- मुक्त पानी थपे पछि, centrifuging अघि केहि मिनेट को लागी छोड्नुहोस्।

Eluent मा A-4 इथेनॉल

---- कुल्ला पछि, फेरि अपकेंद्रित्र र सकेसम्म धेरै धुने बफर हटाउनुहोस्।

A-5 सेल संस्कृति माध्यम पुरा तरिकाले हटाइएको छैन

---- जब कक्षहरु स collecting्कलन, कृपया धेरै भन्दा धेरै संस्कृति माध्यम हटाउन सुनिश्चित गर्नुहोस्।

A-6 RNAstore मा भण्डारण गरिएका कक्षहरु प्रभावी ढंगले centrifuged छैनन्

---- RNAstore घनत्व औसत सेल संस्कृति माध्यम भन्दा ठूलो छ; तसर्थ केन्द्रापसार बल बढाउनु पर्छ। यो 3000x g मा अपकेंद्रित्र गर्न को लागी सुझाव दिईन्छ।

A-7 कम आरएनए सामग्री र नमूना मा बहुतायत

---- कम उपज नमूना को कारण हो भने निर्धारण गर्न एक सकारात्मक नमूना प्रयोग गर्नुहोस्।

A-1 सामग्री ताजा छैन

---- ताजा ऊतकहरु तुरुन्तै तरल नाइट्रोजन मा भण्डारण वा तुरुन्तै निकासी प्रभाव सुनिश्चित गर्न को लागी RNAstore अभिकर्मक मा राखीनु पर्छ।

A-2 नमूना रकम धेरै ठुलो छ

---- नमूना राशि घटाउनुहोस्।

A-3 RNase contamination

---- यद्यपि किट मा प्रदान बफर RNase समावेश गर्दैन, यो निकासी प्रक्रिया को दौरान RNase दूषित गर्न को लागी सजीलो छ र हेरचाह संग संभालिएको हुनुपर्छ।

A-4 इलेक्ट्रोफोरोसिस प्रदूषण

---- वैद्युतकणसंचलन बफर बदल्नुहोस् र उपभोग्य बस्तु र लोड बफर RNase प्रदूषण मुक्त छन् सुनिश्चित गर्नुहोस्।

A-5 इलेक्ट्रोफोरोसिस को लागी धेरै धेरै लोडिंग

---- नमूना लोडिंग को मात्रा घटाउनुहोस्, प्रत्येक कुवा को लोड २ μg भन्दा बढी हुनुहुँदैन।

A-1 नमूना रकम धेरै ठुलो छ

---- नमूना राशि घटाउनुहोस्।

A-2 केहि नमूनाहरु उच्च डीएनए सामग्री छ र DNase संग उपचार गर्न सकिन्छ।

---- प्राप्त आरएनए समाधान गर्न RNase मुक्त DNase उपचार प्रदर्शन, र आरएनए सीधा उपचार पछि पछि प्रयोगहरु को लागी प्रयोग गर्न सकिन्छ, वा थप आरएनए शुद्धिकरण किट द्वारा शुद्ध गर्न सकिन्छ।

ग्लासवेयर को लागी, ४० घण्टा को लागी १५० डिग्री सेल्सियस मा पकाएको। प्लास्टिक कन्टेनरहरु को लागी, १० मिनेट को लागी ०.५ M NaOH मा डुबायो, तब राम्ररी RNase मुक्त पानी संग धोईयो र त्यसपछि RNase लाई पुरा तरिकाले हटाउन को लागी बाँझो। अभिकर्मक वा प्रयोग मा प्रयोग समाधान, विशेष गरी पानी, RNase को मुक्त हुनुपर्छ। सबै अभिकर्मक तयारीहरु को लागी RNase मुक्त पानी को उपयोग गर्नुहोस् (एक सफा गिलास बोतल मा पानी जोड्नुहोस्, 0.1% (V/V) को अन्तिम एकाग्रता DEPC जोड्नुहोस्, रातारात र आटोक्लेभ हिलाउनुहोस्)।